PRODUCCIÓN BOVINA DE CARNE
Director: Guillermo Alejandro Bavera, Méd. Vet., Profesor Titular
Efectivo de Producción Bovina de Carne, Depto. Producción Animal,
Facultad de Agronomía y Veterinaria,
Universidad Nacional de Río Cuarto, Río Cuarto, provincia de Córdoba, República
Argentina
Volver a: Principal > Transplante embrionario
Control del desarrollo
folicular y su aplicación en programas de superovulación de donantes de
embriones
Bó,
G. A.(1) y R. J. Mapletoft (2). 1999. Taurus, 1(4):14-27.
(1) Fac. Cs. Agrop., Univ.
Católica de Cba., Argentina; Inst. Reprod. Animal Cba. (IRAC).
(2) Western College of Veterinary Medicine, University of Saskatchewan, Saskatoon,
Canadá.
Resumen
La
variabilidad en la producción de embriones viables por la donante sigue siendo
el mayor problema de la transferencia de embriones. No obstante, las respuestas superovulatorias pueden aumentarse y
la variabilidad disminuirse si se realizan los tratamientos con gonadotrofinas
al comienzo de la onda folicular, antes de la selección del folículo dominante.
Para esto se pueden realizar ultrasonografías diarias o utilizar tratamientos
que sincronicen el desarrollo folicular.
Existen métodos mecánicos como la aspiración de todos los folículos >
5 mm presentes en el ovario o tratamientos hormonales con progestágenos más
estradiol. El intervalo entre el
tratamiento y el inicio de la superovulación es dé 4 días si utilizamos 5 mg de
E-17B ó 2,5 mg de EB combinados con 50 mg de P4 y de 5 ó 6 días con 3 mg de
norgestomet y 5 mg de EV. Para que el tratamiento con
estradiol sea efectivo, se debe esperar un día para inyectar el estrógeno
después de la colocación de un progestágeno (CIDR-B o SMB) o administrar
progesterona o progestágeno inyectable junto con el estradiol, en
el momento que se coloca el implante.
Además del control del desarrollo folicular se podría controlar la
ovulación mediante la utilización del agonista de la GnRH deslorelina y la
administración de LH porcina. La
posibilidad de independizarse del ciclo estral y poder programar grupos de
donantes llevará a facilitar la aplicación de la técnica de transferencia de
embriones y a disminuir los costos logísticos.
Introducción
La
transferencia embrionaria es la técnica más utilizada en el mundo para
reproducir hembras de alto valor genético.
Sin embargo, los mayores inconvenientes que se presentan en los
programas de selección es la necesidad de comenzar la superestimulación en un
momento determinado del ciclo estral y la poca consistencia en la producción de
embriones viables por las donantes,
sobre todo cuando se considera que entre un 20 y 30 % de las donantes no
produce ningún embrión transferible. Esta variabilidad puede estar influenciada
por factores relacionados con el tratamiento superestimulatorio o en mayor
medida por factores individuales asociados a las características de la dinámica
folicular ovárica.
Esta
revisión tendrá como objetivo presentar los trabajos realizados en los últimos
años para tratar de simplificar los protocolos de superestimulación y, a su
vez, obtener un mayor número de embriones por tratamiento mediante el control
de la dinámica folicular ovárica.
Dinámica folicular y
superovulación tradicional
Experimentos
y pruebas de campo realizados durante la década del 80 llevaron a la conclusión
general que los tratamientos superestimulatorios comenzados durante los días 9
ó 10 después de detectarse el celo resultan en una mejor respuesta
superovulatoría que aquellos iniciados antes (días 2 a 6) o después (día 12 o
13 ). Esto es debido a que durante el
ciclo estral bovino hay 2 o 3 (a veces 4 en el cebú) ondas de desarrollo
folicular y en la mayoría de las vacas la segunda onda folicular comienza, en
promedio, entre los días 9 y 10. No
obstante, hay una gran variación individual y la segunda onda puede comenzar
más temprano (día 6) o más tarde (día 12).
Estudios
realizados durante los últimos 5 anos han demostrado claramente que los
tratamientos superovulatorios deben iniciarse al comienzo de una onda de
desarrollo folicular, antes de la selección del folículo dominante, para obtener
la mejor respuesta posible. La respuesta superovulatoria fue significativamente
mayor cuando los tratamientos se iniciaron el día antes o el día de comienzo de
la onda folicular (ya sea de la primera o segunda onda) que los tratamientos
iniciados 1 o 2 días después. Si tenemos en cuenta estos resultados, la
probabilidad que el comienzo de la superestimulación coincida con el inicio de
la onda folicular es menor al 20 % (1 de 5 o 7 días) y significa que el 80-90 %
de las veces no iniciamos los tratamientos superovulatorios en el período
óptimo. Además, la necesidad de
sincronizar el celo previo (o "base") en grupos de donantes para
comenzar los tratamientos 8 a 12 días después, implica mayor trabajo del
personal, más demora en la programación y el riesgo de una dispersión de celos
que obligue a colectar embriones en distintos días. Una alternativa viable para lograr una mejor respuesta
superovulatoria y obviar los problemas logísticos de programación, es controlar
la dinámica folicular y comenzar los tratamientos en el momento más oportuno
(que el veterinario disponga, no la vaca).
Control del desarrollo
folicular y superovulación
Hay
varios métodos por los cuales se puede controlar la dinámica folicular del
bovino. La mayoría de los tratamientos estudiados han sido orientados hacia la
eliminación del efecto del folículo dominante (por métodos físicos u
hormonales) y de esta manera permitir el comienzo de una nueva onda folicular
en un determinado período conocido. Un
método mecánico es la aspiración de todos los folículos mediante
ultrasonografía transvaginal (también llamado ablación folicular) que resulta
en el comienzo sincrónico de una onda folicular 1,5 días después. Dentro de los métodos hormonales se ha reportado
la utilización estrógenos y progestágenos que inducen la supresión de los
folículos antrales presentes.
Ablación Folicular
Como
se mencionó anteriormente, la ablación folicular resulta en el comienzo
sincrónico de una onda folicular 1,5 días después. Sobre la base de estos
resultados preliminares se diseñaron experimentos para evaluar la respuesta
superovulatoria de la onda folicular sincronizada mediante la ablación. Las vaquillonas del Grupo Control (esquema
tradicional) recibieron una dosis de PGF (500 mcg cloprostenol, Estrumate, Coopers
Agropharm) y fueron superestimuladas entre los días 8 a 12 después del
celo. En las vaquillonas del Grupo
Ablación se aspiraron todos los folículos > 5 mm presentes en el ovario y al
mismo tiempo se colocó un implante de norgestomet (SMB; Syncro-Mate-B, Merial;
sin la porción inyectable) para controlar la fase luteal y se inició la
superestimulación un día después. Los
animales recibieron una sola inyección subcutánea (sc) detrás de la paleta de
Folltropin-V (400 mg NIH-FSH-Pl; Vetrepharm Canadá Inc.), se administró PGF a
las 48 y 60 h de la inyección de Folltropin-V y se inseminó artificialmente
(IA) 60 y 72 h después de la primera PGF.
Los embriones fueron colectados 7 días después de la primera IA (Tabla
l).
Si
bien no hubo diferencias significativas entre los grupos, las respuestas de las
vaquillonas en el Grupo Ablación fueron significativamente menos variables que
las del Grupo Control. Se debe recordar
además que la ablación folicular fue realizada en cualquier momento del ciclo,
por lo tanto utilizando este procedimiento no es necesario sincronizar a las
donantes antes de empezar un programa de superovulación.
La
aspiración folicular también fue utilizada en otros laboratorios en esquemas
más rígidos en relación al ciclo estral.
En uno de estos estudios la aspiración del folículo dominante en el día
6, 7 u 8 del ciclo (2 días antes de comenzar la superestimulación) resultó en
una respuesta significativamente mayor que la de vacas superestimuladas en el
mismo período del ciclo estral, pero con la presencia del folículo dominante.
Utilización de
estrógenos y progestágenos
La
posibilidad del uso de estrógenos y progestágenos para controlar el desarrollo
folicular se basa en el potente efecto supresor de la combinación de estos
esteroides sobre las gonadotrofinas. Los primeros estudios tuvieron como
objetivo determinar la eficacia del tratamiento con progestágeno y
Estradiol-170 (E-170) para suprimir el desarrollo del folículo dominante y de
esta manera sincronizar el desarrollo de una nueva onda folicular. Las
conclusiones más importantes fueron: 1) el tratamiento con progestágeno y
E-17B, administrado en cualquier momento del ciclo estral, induce el
crecimiento sincrónico de una nueva onda folicular, aproximadamente 4,3 días
después y 2) el E-17B suprime el desarrollo folicular cuando es administrado un
día después de la inserción de los implantes de progestágeno, o cuando es
administrado en el mismo momento de la inserción del implante pero en
combinación con progesterona inyectable.
Obtenidas
las conclusiones mencionadas se realizó una serie de experimentos para evaluar
la respuesta superovulatoria en vacas y vaquillonas previamente tratadas con
progestágenos y E-17B. Estos trabajos
incluyeron experimentos controlados y evaluaciones de resultados de campo ya
presentados en detalle en una revisión anterior y por cuestiones de espacio nos
referiremos a los puntos más importantes.
Se utilizaron vacas o vaquillonas de razas carniceras o lecheras y el
tratamiento en estudio consistió en la colocación de un dispositivo de
liberación lenta de progestágeno (SMB o CIDR-B) en momentos no conocidos del
ciclo estral (denominado arbitrariamente día 0), 5 mg de E-17B a las 24 h (día
1) y la superestimulación con Folltropin-V se inició en el día 5 (4 días después
del E-17B). Los animales
superestimulados de acuerdo al método tradicional recibieron una inyección de
PGF para sincronizar el "celo base" y fueron superestimulados entre
los días 8 a 12 después del celo. Los
resultados combinados de dos experimentos y dos evaluaciones de campo en las
cuales se compararon estos dos tratamientos están resumidos en la Tabla 2.
Se
indican las medias solamente y no se realizó una comparación estadística debido
al origen diferente de los datos. Dos
trabajos encontraron un mayor número de embriones transferibles y en los otros
dos no hubo diferencias significativas. Tal
vez es interesante destacar que en los trabajos a campo se observó una
tendencia hacia un menor porcentaje de animales tratados con progestágeno y E-17B
que no produjeron ningún embrión transferible (16/123, 13%) que en los
superestimulados siguiendo el esquema tradicional (24/111, 22%).
Programas
de este tipo están siendo utilizados por distintos profesionales y algunos resultados
de ellos se presentan en esta sección.
Lewis y Trouson realizaron una experiencia de campo en la que se
utilizaron un total de 58 animales en 6 establecimientos de Victoria
(Australia). En este protocolo, los
animales recibieron 2 inyecciones de PGF cada 11 días. Seis días después de la última PGF, las
vacas recibieron un dispositivo intravaginal de progesterona CIDR-B (InterAg,
Nueva Zelandia). A los 3 días de colocado
el CIDR-B la mitad de las donantes recibieron una inyección intramuscular (im)
de 5 mg de E-17B mientras que la otra mitad de los animales no recibieron la
inyección de E-17B. Todas las donantes
fueron superestimuladas 7 días después de colocado el CIDR-B (o 4 días post
E-17B). Los resultados que se
encuentran en la Tabla 3 muestran que los animales que recibieron E-17B
tuvieron una tendencia (P=0,061) a producir un número mayor de embriones
transferibles.
En
otro experimento realizado en Argentina se evaluó la respuesta superovulatoria
de donantes comerciales de embriones superestimuladas utilizando los
dispositivos intravaginales de progesterona CIDR-B y E-17B. Los datos corresponden a 138
superovulaciones en vacas donantes de las razas Holando Argentino (n= 115) y
Jersey (n=23). Las donantes del Grupo
CIDRB+E-17B recibieron el CIDR-B en momentos no conocidos del ciclo estral (día
0), 5 mg de E-17B (disuelto en
2 ml de aceite de girasol) por vía im en el día 1 y fueron superestimuladas a
los 4 días del E-17B (día 5). Las donantes tratadas tradicionalmente (Grupo
Tradicional) fueron superestimuladas entre 8 a 12 días después de detectado el
celo. Todas las vacas recibieron 400 mg
NIH-FSH-Pl de Folltropin-V (20 ml; Vetrepharm Canadá Inc.) en 4 dosis
decrecientes (4, 3, 2 y 1 ml) administradas im cada 12 h y por 4 días. A las 48 h de comenzada la superestimulación
todos los animales recibieron una inyección de PGF y se retiró el CIDR-B, 12 h
después. Las donantes fueron IA a las
12 y 24 h de comenzado el celo. Los embriones fueron colectados a los 7 días
del celo y fueron clasificados como ovocitos/embriones totales, ovocitos
fertilizados y embriones transferibles.
Los datos obtenidos fueron analizados por el test t de Student. El porcentaje de animales que no produjo
ningún embrión transferible (Donantes con "0" embriones) fue
analizado por el test de Chi cuadrado.
Los resultados se encuentran en la Tabla 4.
Para
resumir, estos experimentos demuestran que el tratamiento de progestágeno más
E-17B resulta en el crecimiento sincrónico de una nueva onda folicular, que comienza
en promedio 4,3 días después.
Utilizando este tratamiento se puede sincronizar el desarrollo folicular
en un grupo de donantes, sin importar el estadio del ciclo en que se
encuentran. Los tratamientos comenzados
en el momento del inicio de la nueva onda folicular (4 días pos E-17B) resultan
en una respuesta comparable o superior a la de los tratamientos iniciados de la
manera tradicional. Este procedimiento
tiene la ventaja de poder elegir el momento para realizar la colección y
facilita la programación de grupos de donantes en un determinado
establecimiento.
1. Preparados
comerciales
Los
trabajos anteriormente descritos demuestran la efectividad en la utilización de
tratamientos con E-17B y progestágenos en programas de superovulación. El mayor inconveniente del E-17B es que no
se encuentra disponible como preparado comercial en el mercado argentino y hay
que prepararlo especialmente a partir de la droga pura (-estradiol E-8875,
Sigma Chemical Company, USA). El
objetivo de los experimentos que se presentan a continuación fue evaluar
distintos estrógenos disponibles en el mercado.
a) Valerato de
estradiol
El
valerato de estradiol (EV) es un estrógeno de vida media larga que se encuentra
disponible en el mercado asociado con implantes que contienen el progestágeno
sintético norgestomet. Estos preparados
comerciales son el Syncro-Mate-B (SMB, Merial) y el Crestar (Intervet Int.) y
consisten en un implante de liberación lenta de norgestomet que se coloca se en
la oreja del animal, y una solución inyectable oleosa que contiene 3 mg de
norgestomet (N) y 5 mg de EV.
Originalmente se recomendaba comenzar los tratamientos
superestimulatorios a los 7 días de aplicado el implante en la oreja y de
administrada la inyección im de N+EV. Sin embargo se observó por
ultrasonografía que los folículos presentes en el momento del tratamiento (SMB
y la inyección de N+EV) disminuyeron su tamaño por un período de 5 días, para
luego volver a aumentar, aparentemente debido al crecimiento de una nueva onda
folicular. Basados en los resultados de
este trabajo, muchos profesionales comenzaron los tratamientos
superestimulatorios a los 5 días pos EV.
En un ensayo de campo se comparó la producción de embriones de donantes
superestimuladas de la manera tradicional, comenzando los tratamientos en los
días 8 a 12 después del celo, con vacas tratadas con SMB y la inyección de N+EV
(Grupos SMB+EV) y que fueron superestimuladas 5 o 7 días después. Los resultados se muestran en la Tabla 5.
Como
se puede ver claramente en la Tabla 5, los animales tratados a los 5 días pos
SMB+EV tuvieron un número mayor de embriones transferibles que las donantes en
los otros 2 grupos.
En
otro trabajo de campo se superestimularon un total de 248 donantes en un
período de 6 meses. Antes de comenzar
cada programa todas las vacas fueron tratadas con PGF. Las vacas que mostraron celo dentro de las
48-96 h pos PGF fueron superestimuladas siguiendo el protocolo tradicional (8 a
12 días pos celo). Todos los animales
que no fueron observados en celo recibieron el implante de SMB más N+EV y
fueron superestimulados 4 o 5 días después.
No se encontraron diferencias significativas en el número de embriones
transferibles entre los animales tratados convencionalmente (7,05 ± 1,0) y los
tratados con SMB y superestimulados 4 días (6,38 ± 0,8) o 5 días (6,38 ± 0,8)
después. En esta comparación hay que
considerar que los animales tratados con SMB+EV no fueron vistos en celo y por
lo tanto podrían haberse incluido algunos "animales problema". Nuevamente aquí lo más importante es que los
programas de superovulación a campo se pudieron realizar con una buena
coordinación y este esquema práctico es actualmente utilizado por numerosos
profesionales.
En
un trabajo reciente, se evaluó la respuesta superovulatoria de donantes de
embriones comerciales de razas de carne (n=181) y leche (n=219)
superestimuladas durante 1997 utilizando los dispositivos CIDR-B (Eazy-Breed,
Boehringer-Ingelheim) y Syncro-Mate-B (SMB, Merial) o por el protocolo
tradicional. Las donantes tratadas
tradicionalmente fueron superestimuladas con Folltropin-V (Vetrepharm Canadá
Inc.) entre 8 a 12 días después de detectado el celo. Las otras donantes recibieron, en momentos no conocidos del ciclo
estral (día 0), 2 implantes subcutáneos de SMB o un dispositivo vaginal
CIDR-B. En el mismo momento que se
colocaron los SMB o CIDR-B las vacas recibieron una inyección im de 5 mg de
Valerato de Estradiol (EV) y 3 mg de norgestomet (Merial) y fueron
superestimuladas con Folltropin-V en el día 5. A las 48 h de comenzada la
superestimulación todos los animales recibieron una inyección im de PGF y se
retiraron los dispositivos 12 h después.
Las donantes fueron IA 12 y 24 h de comenzado el celo. Los embriones fueron colectados a los 7 d
del celo y clasificados como ovocitos/embriones totales, ovocitos fertilizados
y embriones transferibles. Además, se
evaluó el porcentaje de animales que no produjo ningún embrión transferible
(donantes con "0" emb. transf.). Los resultados se encuentran en la
Tabla 6.
Tomados
los datos en general, los tratamientos con CIDR-B y SMB tendieron (P<0,08) a
disminuir el porcentaje de superovulaciones donde no se obtuvo ningún embrión
transferible comparados con el tratamiento tradicional. Los resultados demuestran que los tratamientos
con progestágenos y estrógenos son una alternativa viable y eficiente para
sincronizar el desarrollo folicular y superestimular vacas donantes en esquemas
comerciales de transferencia de embriones, eliminando la necesidad de
sincronizar el celo antes de comenzar la superovulación.
A
pesar de que los resultados con EV+N son alentadores, resultados de un
experimento realizado durante 1998 tenderían a sugerir que el EV no es tan
efectivo para sincronizar el desarrollo folicular como el E-17B. Se trataron vaquillonas
de carne con un implante de SMB o un implante de Crestar y a su vez fueron
subdivididas para recibir 5 mg de E-17B y 100 mg de P4 o 5 mg de EV y 3 mg de
norgestomet. Las inyecciones fueron
administradas en el mismo momento de la inserción del implante. Los resultados se encuentran indicados en la
Tabla 7.
Como
se puede observar, el intervalo tratamiento-onda fue más largo con el EV que
con el E-17B y a su vez el comienzo de la onda fue más variable. Basados en estos resultados se diseñó un experimento
con el objetivo de comparar el tratamiento de EV + N administrado en el momento
de la inserción de 2 implantes SMB (día 0) con el tratamiento de 5 mg E- 17B y
100 mg de progesterona en el día 1 de la inserción de los SMB. Se utilizó un grupo de 68 vacas
Holstein. La superestimulación fue
iniciada en la tarde del día 5 y se utilizaron 400 mg NIH-FSH-Pl de
Folltropin-V en 8 dosis decrecientes cada 12 h. Todas las vacas recibieron PGF
en la mañana y tarde del día 8 y los SMB fueron removidos en la tarde del día
8. Las vacas fueron IA 12, 24 y 36 h después del comienzo del celo y los
embriones fueron colectados a los 7 días.
Los resultados se presentan en la Tabla 8.
Los
resultados de este experimento muestran que la mayor sincronía de comienzo de
onda con el tratamiento de E-17B + P4 resultó en un número mayor de embriones
colectados.
b) Benzoato de
estradiol
El
benzoato de estradiol (EB) es otro estrógeno comercial disponible en el mercado
(Laboratorio Río de Janeiro). Se
realizaron cuatro experimentos para evaluar la efectividad de distintas formas
de EB sobre el control del desarrollo folicular. Las conclusiones más
importantes fueron las siguientes: 1) El EB suprime el desarrollo folicular
cuando es administrado un día después de la inserción de los dispositivos con
progestágeno o cuando es administrado en el mismo momento de la inserción del
implante combinado con la administración im de 50 o 100 mg de progesterona. 2)
De las distintas dosis evaluadas (1 mg, 2,5 mg y 5 mg de EB - todas combinadas
con 50 mg de Progesterona) la de 2,5 mg de EB fue la dosis mínima más efectiva,
con un intervalo entre tratamiento y comienzo de la nueva onda folicular de 3,9
días (rango 3 a 4 días).
Se
diseñó un experimento con el objetivo de comparar el tratamiento de EB+P4
administrado en el momento de la inserción de los dispositivos intravaginales
CIDR-B (Boehringer-Ingelheim) con el tratamiento de E-17B en el día 1 y un
tratamiento alternativo de E-17B en el cual se administró combinado con 50 mg
P4 en el día 0. Se utilizó un grupo de 15 vacas Aberdeen Angus colorado que
fueron superestimuladas tres veces con un intervalo entre tratamientos de 45
días. Para la distribución de los
animales en cada réplica, las 15 vacas fueron separadas al azar en 3 grupos y
rotadas por cada uno de ellos de forma tal que cada vaca fue tratada una vez
por cada uno de los tratamientos y todos los grupos estuvieron igualmente
representados en cada réplica. Se
colocaron los dispositivos intravaginales CIDR-B y se realizaron los siguientes
tratamientos: 5 mg E-17B im día 1 o, 5 mg E-17B + 50 mg P4 im día 0, o 2,5 mg
EB + 50 mg P4 im en el día 0. La superestimulación fue iniciada a los 4
días pos E-17B o EB y se utilizaron 400 mg NIH-FSH-Pl de Folltropin-V en 8
dosis decrecientes cada 12 h. Todas las vacas recibieron PGF 48 h después del
inicio de la superestimulación y los CIDR-B fueron removidos 12 h después. Las vacas fueron IA 60 y 72 h pos PGF y los
embriones fueron colectados a los 7 días.
Los resultados se presentan en la Tabla 9.
Los
resultados de este experimento muestran que no hubo diferencias significativas,
sugiriendo que cualquiera de estos tres tratamientos puede ser usado
exitosamente.
Durante
este último año estuvimos trabajando en un nuevo protocolo para tratar de
mejorar el número de embriones de buena calidad utilizando un tratamiento con
gonadotrofina coriónica equina (eCG) antes de comenzar la superovulación. La hipótesis planteada es que la adición de
eCG en el mismo momento del pico endógeno de FSH aumentará el número de
folículos antrales con capacidad de responder al tratamiento
superestimulatorio, y resultará en un número mayor de embriones por
tratamiento. Durante 1998 se superovularon
112 vacas de carne que recibieron un CIDR-B (Boehringer-Ingelheim, Argentina)
en combinación con 2,5 mg EB (Laboratorio Río de Janeiro, Argentina) y 50 mg P4 (Laboratorio Río de Janeiro,
Argentina) intramuscular (im) en momento no conocidos del ciclo estral (día
0). Las vacas de los grupos eCG
recibieron 300 U.I. de eCG en el día 2 o 3 pos CIDR (24 h antes o en el momento
esperado del pico endógeno de FSH previo a la onda folicular). Todas las vacas fueron superestimuladas en
el día 4 con 400 mg NIH-FSH-Pl de FolltropinV (Vetrepharm Canadá Inc, London,
ON, Canadá) administrados en forma im y en 8 dosis decrecientes cada 12 h. Se
administraron 25 mg de dinoprost (PGF, Lutalyse, Romage, Argentina) 48 y 60 h
después del inicio de la superovulación y los CIDR-B fueron removidos junto con
la segunda dosis de PGF. Las vacas
fueron IA 60 y 72 h después de la primera PGF.
Los embriones fueron colectados por método no quirúrgico a los 7 días de la primera IA y evaluados según las
normas de la Sociedad Internacional de Transferencia de Embriones (IETS). Los datos cuantitativos fueron analizados
por ANOVA y los datos cualitativos fueron comparados por el test de Chi
Cuadrado y se presentan en la Tabla 10.
No hubo diferencias significativas entre los grupos
en la respuesta superovulatoria. Sin
embargo, el mayor porcentaje de ovocitos fertilizados en el grupo eCG día 3
sugiere que el pretratamiento con eCG podría tener un efecto beneficioso sobre el índice de
fertilización.
Sincronización de la
ovulación
La
sincronía de la ovulación también es uno de los problemas reportados como causa
de pobre respuesta superovulatoria. Los
tratamientos con análogos de la GNRH, hCG o LH utilizados en el momento del
celo o de la primera IA han demostrado ser beneficiosos cuando se lo utiliza en
"vacas problema", en las que se había observado previamente una gran
cantidad de folículos anovulatorios en el momento de la colección . Sin
embargo, la utilización masiva de estos agentes no ha resultado ser
significativamente beneficioso cuando se lo utiliza sistemáticamente. Recientemente se han reportado experimentos
tendientes a programar y sincronizar la ovulación de vaquillonas
superestimuladas utilizando un agonista de la GNRH llamado deslorelinal. El tratamiento con este agonista de la GNRH
produce la saturación ("downregulation" ) de los receptores de GNRH y
de esta forma las vacas tratadas tienen inhibida la secreción pulsátil y el
pico preovulatorio de LH. Los
resultados de los experimentos preliminares demostraron que si se aplican dos
implantes sc de deslorelina (liberan 50 g/día) en vaquillonas Brahman
superestimuladas, se inhibe la ovulación.
Además, se comprobó que era posible inducir la ovulación mediante la
administración exógena de LH porcina (Lutropin-V, Vetrepharm Canadá Inc.), que
se produjo entre 24 y 40 h (media 32 h) pos inyección de LH.
Luego
se diseñó un experimento para evaluar la utilización de este protocolo en la
sincronización de la ovulación de vaquillonas superestimuladas. Se utilizaron 15 vaquillonas Brahman que
fueron divididas en dos grupos. En el
día 0 los animales del Grupo Control recibieron un implante de Crestar y los
del otro Grupo recibieron 2 implantes de deslorelina. A los 7 días se inició la superestimulación, se inyectó PGF 48 h
después y los Crestar fueron removidos 12 h más tarde. Los animales con deslorelina recibieron 25
mg de LH a las 60 h de la PGF y fueron IA a tiempo fijo 12 h después. Los animales del Grupo Control fueron IA en
el momento del estro, 12 y 24 h después.
Los resultados se presentan en la Tabla 11.
Los
resultados indican que el protocolo combinando la aplicación del agonista de
GNRH más LH induce una ovulación sincrónica en vaquillonas permitiendo realizar
una sola IA a tiempo fijo. Este esquema
plantea además dos alternativas prácticas interesantes: 1) La posibilidad de
utilizar un tratamiento de este tipo cuando usamos semen congelado de muy alto
valor y 2) La utilización de este protocolo en donantes Bos Indicus donde el estrés podría afectar la respuesta
superovulatoria, principalmente debido a alteraciones en la ovulación
Conclusiones
La
variabilidad en la producción de embriones viables por la donante sigue siendo
el mayor problema de la transferencia de embriones. No obstante, las respuestas superovulatorias pueden aumentarse y
la variabilidad disminuirse (no eliminarse) si se realizan los tratamientos con
gonadotrofinas al comienzo de la onda folicular, antes de la selección del
folículo dominante. Para comenzar los
tratamientos superestimulatorios en el inicio de la onda se pueden realizar
ultrasonografías diarias o utilizar tratamientos que sincronicen el desarrollo
folicular. Existen métodos mecánicos
como la aspiración de todos los folículos > 5 mm presentes en el
ovario (la superovulación debe iniciarse 1 o 2 días después) o tratamientos
hormonales con progestágenos más estradiol.
El intervalo entre el tratamiento y el inicio de la superovulación es de
4 días si utilizamos 5 mg de E-17B o 2,5 mg de EB combinados con 50 mg de P4 y
de 5 o 6 días con 3 mg de norgestomet y 5 mg de EV. Para que el tratamiento con
estradiol sea efectivo, se debe esperar un día para inyectar el estrógeno
después de la colocación de un progestágeno (CIDR-B o SMB) o administrar
progesterona o progestágeno inyectable junto con el estradiol, en el momento
que se coloca el implante. Además del
control del desarrollo folicular se podría controlar la ovulación mediante la
utilización del agonista de la GNRH deslorelina y la administración de LH
porcina. Tal vez lo más interesante de
estos tratamientos es la posibilidad de independizarse del ciclo estral y poder
programar grupos de donantes. Esto sin
duda llevará a facilitar la aplicación de la técnica de transferencia de
embriones y disminuirá los costos logísticos, ya que se puede elegir
arbitrariamente el momento de la colección y armar circuitos, disminuyendo de
esta manera los costos de movilidad de los profesionales.
Bibliografía
1. Adams. G.P., Nasser. L.F.. Bó. G.A.
García. A. Del Campo, M.R.. Mapletoft. R.J. Superstimulatorv response of ovarian
follicles of Wave 1 versus Wave 2 in heifers.
Theriogenology 1994: 42:1103-1113.
2. Bergfelt. D.R.. Lightfoot. K.C., Adams, G.P. Ovarian svnchroiiization following
ultrasound-guided transvag inal follicle ablation in heifers. Theriogenology 199442:895-907.
3. Bergfelt. D.R.. Bó.
G.A., Mapletoft, R.J., Adams. G.1.
Superovulatory response following ablation-induced follicular wave emergence in
cattle. An Reprod Se¡ 1997. 49:1-12 (1997).
4. Bó, G.A..
Pierson. R.A.. Mapletoft. R.J.. The effect of estradiol valerate on
follicular dynamics and superovulatorn, response in cows with Syncro-Mate-B
implants. Theriogenology 1991
36:169-183.
5. Bó G.A.. Adams,
G.P.. Pierson. R.A., Caccia, M., Tribulo, H.. Mapletoft. R.J.. Follicular wave dynamics after
estradiol- 17 treatment of heifers with or without a progestogen implant. Theriogenology 1994; 41:15551569.
6. Bó. G.A.. Hockley. DK., Nasser. L.F., Mapletoft, R.J. Superovulatory response to a single
subcutaneous injection of a porcine pituitary extract in bcef cattle. Theriogenology 1994-. 42:963-975.
7. Bó. G.A.. Adams,
G.P.. Caccia. M. Martinez, M.. Pierson. R.A., Mapletoft. R.J.. Ovarian follicular wave emergence after treatment with
progestogen and estradiol in cattle. Anim
Reprod Se¡ 1995;39:193-204
8. Bó. G.A.,
Adams, G.P., Pierson RA, Mapletoft RJ.
Exogenous control of follicular development in cattle. Theriogenology 1995-. 43:3 1-40.
9. Ból, G.A.. Adams,
G.P.. Pierson, R.A., Mapletoft, R.J.. Effect of progestogen plus estradiol-17B
treatment on superovulatory response in beef cattle. Theriogenology 1996-- 45:897-910.
10. Bó, G.A.,
Caccia, M., Martinez, M., Mapletoft, R.J.. Follicular wave emergence after
treatment with estradiol benzoate and CIDR-B vaginal devices in beef
cattle. Proc. 13 th International
Congress on Animal Reproduction, Sydney, Australia, 1996; P7-22.
11. Bó.
GA.,. Bergfelt DR. y Mapletoft, R.J. Manipulación de la dinámica
folicular en el ganado bovino: Su aplicación en programas de transferencia de
embriones. Resúmenes Segundo Simposio
Internacional de Reproducción Animal, Carlos Paz, Córdoba, 1996, 1:53-68.
12. Bó, G.A.,
Tríbulo, H.T, Caccia, M. and Tríbulo, R. Superovulatory response of beef
heifers treated with estradiol benzoate, progesterone and CIDR-B vaginal
devices. Theriogenology 1998; 49:375.
13. Bungarts,
L., Niemann, H.. Assessment of the presence of a dominant follicle and
selection of dairy cows suitable for superovulation by a single ultrasound
examination. J Reprod Fertil 1994;
101:583-591.
14. Caccia,l
M., Ungerfield, R., Mapletoft, R.J., Bó, G.A. Efecto de la dosis y vía de
administración del benzoato de estradiol en vacas con CIDR-B. Resúmenes Segundo Simposio Internacional de
Reproducción Animal, Carlos Paz, Córdoba, Argentina, 1996; 1:249.
15. Caccia, M.
and Bó, G.A.. Follicle wave emergence following treatment of CIDR-B implanted
beef cows with estradiol benzoate and progesterone. Theriogenology 1998; 49:341.
16. Caccia, M.,
Tríbulo. R., Tríbulo, H., Bó, G.A..
Effect of different estrogen and progesterone treatments on superovulatory
response in beef (bos taurus) cattle.
XIII Reunión Anual Sociedad Brasileña de Tranferencia Embrionaria. Sao Pablo, Brasil, Arq Fac Vet UFRGS 1998;
26:233.
17. Caccia, M.,
Tríbulo, R., Tríbulo, H. and Bó, G.A.. Effect of pretreatment with eCG on
superovulatory response in beef cattle treated with CIDR-B, estrogen and
progesterone. Theriogenology 51:403,
1999.
18. D'Occhio, M.J.,
Sudha, G., Jillella, D., Whyte T,.
Maciellan, L.J., Walsh, J., Trigg, T.E.,. Miller, D.. Use of GNRH
agonist to prevent the endogenous LH surge and injection of exogenous LH to
induce ovulation in heifers superstimulated with FSH: a new model for
superovulation. Theriogenology
1997;47:601-613.
19. D'Occhio, M.J.,
Jillella, D. Lindsey, B.R. Factors that intluence follicle recruitment, growth
and ovulation during ovarian superstimulation in heifers: opertunities to
increase ovulation rate and embryo recovery by delaying the exposure of
follicies to LH. Theriogenology 1999;
51:9-36.
20. Ginther
OJ.,. Kastelic, J.P., Knopf, L.. Composition and characteristics of follicular
waves during the bovine estrous cycle.
Anim Reprod Se¡ 1989-, 20:187-200. 2 1. Hahn, J. Attempts to explain and
reduce variability of superovulation.
Theriogenology 1992-, 38:269-275.
22. Huhtinen,
M. Raino. V.. Aalto, J.. Bredbacka P.
Increased ovarlan responsos in the absence of the dominant follicle in
superovulated cows. Theriogenology
1992-. 37:457-463.
23. Lewis,
l.M.. Trounson . A.O. Superovulation in catchemical ablation of the dominant
follicle using estradiol-17B. Singapore
Journal of Obstetrics and Gynaecology 1996: 27(1):63-65.
24. Lindsell. C.E ... Murphy, B.D., Mapletoft, R.J.
Superevulatory and endocrino responsos in heifers treated with FSH-P at
different stages of the estrous cy,cle.
Theriogenology, 1986: 26:209-219.
25. Mapletoft. R.J. Superovulación en el ganado
bovino. Resúmenes Segundo Simposio
Internacional de Reproducción Animal.
Carlos Paz. Córdoba, Argentina.
1996-,1:69-85.
26.Mapletoft. R..J.. Bó. G.A.. Murphv. B.D.. The
effect of biological activity of gonadotropins en superovulation in the
cov. Proc IX Congreso Brasileiro de
Reproducao Animal 1991: 1:74-92.
27. Mapletoft,RJ...
Martinez. M.F.. Adams. G.P., Kastelic, J. and Burnley, C.A.. The
effect of estradiol preparation on follicular wave emergence and superovulatory
response in norgestomet-implanted cattle.
Theriogenology 1999: 47:41 1.
28. Nasser,
L.F.. Adams. G.P., Bó. G.A.. Mapletoft. R.J. Ovarian superstimulatory response relative to follicular
wave emergence in heifers.
Theriogenology 1993; 40:713-724.
29. Nigro, M..
Burri, E., Bó, G..A. Respuestas superoyulatorias utilizando el tratamiento de
CIDR-B y estradiol-17B en programas comerciales de transferencia de
embriones. Resúmenes Segundo Simposio
Internacional de Reproducción Animal.
Carlos Paz, Córdoba; Argentina 1996; 1:268.
30. Nigro., M.,
Burry, E., Mapletoft, R.J., Bó, G.A. Respuesta superovulatoria en vacas
lecheras tratadas con Lutropin-V en la primera inseminación. Resúmenes Segundo Simposio Internacional de
Reproducción Animal, Carlos Paz, Córdoba.. Argentina, 1996; 1:267.
31. Nigro. M., Burry, E.. Bó, G.A. Respuesta
superovulatoria utilizando tratamientos con CIDR-B o SincroMate-B y, Valerato
de Estradiol en programas comerciales de transferencia de embriones
bovinos. Cuat-tas Jornadas CABIA y
Primeras del Mercosur, 1998.
Volver a: Principal > Transplante embrionario > Principio del documento